熒光PCR試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)過(guò)程假陽(yáng)性的原因和解決方法總結(jié)

熒光PCR試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增巴戟天，與其他植物沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. PCR試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

PCR 實(shí)驗(yàn)過(guò)程假陽(yáng)性原因及解決方法

現(xiàn)象：空白對(duì)照出現(xiàn)條帶

可能原因：

1、引物設(shè)計(jì)不適，與目的序列具有同源性。

2、試劑污染：水、移液槍等被核酸污染。

3、樣品間出現(xiàn)交叉污染。

解決方法：

1、實(shí)驗(yàn)儀器高壓滅菌。

2、實(shí)驗(yàn)試劑（酶除外）高壓滅菌，離心管槍頭一次性使用。

3、規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作。

4、假陽(yáng)性可通過(guò)巢式 PCR 解決，或者使用特異性較高的試劑盒擴(kuò)增。